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小鼠早期胚胎CSD基因及牛磺酸的表达研究

范晶晶;李炜;吕钊旭;冯永珍;郑秋闿;潍坊学院生物与农业工程学院;山东省高校生物化学与分子生物学重点实验室;潍坊护理职业学院内科教研室;山东省潍坊市妇幼保健院新生儿科;潍坊学院校医院护理部;潍坊学院化学化工与环境工程学院;

摘要: 目的研究半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)及牛磺酸在小鼠早期胚胎发育过程中的表达。方法小鼠超排卵后自然交配,分别在交配后不同时间收集2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚、囊胚期胚胎,采用逆转录PCR(RT-PCR)、免疫荧光染色方法检测CSD及牛磺酸的表达情况。结果着床前不同时期小鼠胚胎都有CSD mRNA的表达,且呈逐渐升高趋势,桑葚胚表达量急剧升高,囊胚期达到最高值。免疫荧光染色结果显示CSD和牛磺酸在早期胚胎各阶段都有表达,主要表达在细胞质中。结论在小鼠早期胚胎发育过程中牛磺酸可能通过CSD途径合成,牛磺酸可能在小鼠早期胚胎细胞的分裂和分化过程起重要作用。
关键词:半胱亚磺酸脱羧酶;牛磺酸;胚胎发育;基因表达;
基金:山东省自然科学基金项目(ZR2016CB28); ;国家星火计划项目(2015GA740060); ;山东省莱州湾海洋动物健康养殖工程技术协同创新中心(CXGX15005PT); ;山东省潍坊市科学技术发展计划项目(2016GX022,2017GX005); ;

参考文献:
[1]牛磺酸对昆明小鼠早期胚胎体外发育和着床的影响[J]. 范晶晶,郑秋闿. 上海交通大学学报(农业科学版). 2016(01)
[2]牛磺酸在牛胚胎体外发育中的作用研究[J]. 袁水桥,罗光彬,李东全,王冰松. 沈阳农业大学学报. 2007(04)
[3]早期胚胎发育与调控因子的研究进展[J]. 张晋平,李跃民. 动物医学进展. 2006(01)
[1]Mammalian CSAD and GADL1 have distinct biochemical properties and patterns of brain expression[J] . Ingeborg Winge,Knut Teigen,Agnete Fossbakk,Elaheh Mahootchi,Rune Kleppe,Filip Sk?ldberg,Olle K?mpe,Jan Haavik. Neurochemistry International . 2015
[2]Development of a Novel Cysteine Sulfinic Acid Decarboxylase Knockout Mouse: Dietary Taurine Reduces Neonatal Mortality[J] . Eunkyue Park,Seung Yong Park,Carl Dobkin,Georgia Schuller-Levis,Guoyao Wu. Journal of Amino Acids . 2014
[3]Taurine Inhibits K+-Cl? Cotransporter KCC2 to Regulate Embryonic Cl? Homeostasis via With-no-lysine (WNK) Protein Kinase Signaling Pathway[J] . Koichi Inoue,Tomonori Furukawa,Tatsuro Kumada,Junko Yamada,Tianying Wang,Rieko Inoue,Atsuo Fukuda. Journal of Biological Chemistry . 2012 (25)
[4]Concentration and composition of free amino acids and osmolalities of porcine oviductal and uterine fluid and their effects on development of porcine IVF embryos[J] . RongfengLi,KristinWhitworth,LiangxueLai,DavidWax,LeeSpate,Clifton N.Murphy,AugustRieke,ClayIsom,YanhongHao,ZhishengZhong,MikaKatayama,HeideSchatten,Randall S.Prather. Mol. Reprod. Dev. . 2007 (9)
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[2] Estradiol decreases taurine level by reducing cysteine sulfinic acid decarboxylase via the estrogen receptor-a in female mice liver. Ma Q,Zhao J,Cao W,Cui S. American Journal of Physiology Gastrointestinal and Liver Physiology . 2015
[3] The effect of supplementation of amino acids and taurine to modified KSOM culture medium on rat embryo development. Nakamura K,Morimoto K,Shima K,et al. Theriogenology . 2016
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[5] Immunohistochemical Localization of Taurine in the Rat Ovary, Oviduct, and Uterus. Maria V.T. Lobo,F. Javier M. Alonso,Amparo Latorre,Rafael Martín del Río. Journal of Histochemistry & Cytochemistry . 2001
[6] A novel cysteine sulfinic acid decarboxylase knock-out mouse:comparison between newborn and weanling mice. Park E,Park S Y,Dobkin C,et al. Advances in Experimental Medicine and Biology . 2015
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[8] Amino acid metabolism in human embryos. DRABKOVA P,ANDRLOVA L,HAMPL R,et al. Physiological Research . 2016
[9] The physiological and pathophysiological roles of taurine in adipose tissue in relation to obesity. MURAKAMI S. Life Sciences . 2017

  • 肺结节的外科治疗策略

    作者:李何子;汪天虎; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    肺结节是最常见的影像学改变之一。随着健康检查的普及,越来越多的肺结节特别是肺小结节被发现,这些体检发现的肺结节不但让患者高度紧张,也一度困扰医务人员。为了规范化地进行随访和治疗,近年国内外已出台了很多指南和专家共识。肺结节是否应该进行外科治疗,需要临床专科医生按照指南来进行规范和详细地评估。对于明确需要手术的患者,目前提倡精准化、微创化和个性化的进行治疗。为了更好地把握肺结节的手术适应证、手术策略和选择合适的手术方式,本文就此进行相关概述。
    关键词:结节病,肺;胸外科手术,电视辅助;成像,三维;指南;

    指南

  • 早期肺腺癌患者预后及早期复发病理特征的研究

    作者:陈志彪;刘杰;张亮;李梦侠;卢先锋;肖华亮;杨宇馨;戴楠;单锦露;王东; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 术后复发转移是早期肺腺癌治疗失败的主要原因,探寻其临床病理特征有利于筛选预测复发转移的高危患者。方法 随访分析157例手术治疗、病理确诊为早期肺腺癌患者的整体复发及生存时间,重点探讨早期复发患者的临床病理特征。结果 157例早期肺腺癌患者的中位无复发生存(RFS)时间为55.0个月,1、2和5年RFS率分别为86.0%、75.8%和45.0%;总生存率分别为98.1%、96.0%和84.1%。157例早期肺腺癌患者中,69例复发转移,其中1年内早期复发者为22例(14.0%)。统计分析结果显示,肿瘤大小、组织学亚型是影响早期肺腺癌术后患者RFS的危险因素(P<0.05),低分化和非贴壁为主型可能是早期复发患者的病理学特征。结论 肿瘤直径大于2cm、非贴壁为主型和低分化可能是预测早期肺腺癌复发与早期复发的重要因素。
    关键词:肺腺癌;预后;早期复发;

    肺腺癌预后早期复发

  • 当归红芪超滤物对顺铂诱导大鼠肾足细胞损伤的保护作用研究

    作者:李竺娟;寇炜;朱琳菊;孙少伯;马桂兰; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 探究当归红芪超滤物(RAS-RH)对顺铂体外诱导大鼠肾足细胞损伤的保护作用。方法本实验选取大鼠肾足细胞分为对照组、药物组、顺铂组及联合组,采用倒置相差显微镜观察顺铂对大鼠肾足细胞生长的影响,利用实时细胞分析技术监测给予RAS-RH前、后细胞的生长指数(CI),流式细胞仪检测大鼠肾足细胞的凋亡率。结果 顺铂对大鼠肾足细胞生长增殖具有明显抑制作用,联合组对顺铂诱导的大鼠肾足细胞损伤具显著的保护作用;流式细胞仪显示,联合组大鼠肾足细胞凋亡率明显低于顺铂组凋亡率(P<0.05)。结论 RAS-RH对顺铂诱导的体外大鼠肾足细胞损伤具有明显的保护作用。
    关键词:当归红芪超滤物;大鼠肾足细胞;顺铂;凋亡;

    当归红芪超滤物顺铂凋亡

  • 花粉症患者伴发口腔过敏综合征的临床特征及危险因素分析

    作者:王晓艳;李晓荣;庄严;石海云;王学艳; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 探讨花粉症患者伴发口腔过敏综合征(OAS)的临床特征及危险因素。方法 205例花粉症患者纳入研究,接受面对面问卷调查并进行过敏原皮肤点刺试验(SPT),进行统计分析。结果 花粉症患者中OAS发病率为27.3%(56/205)。OAS组出现呼吸道症状的概率显著高于非OAS组(33.9%vs.16.1%,P=0.005),OAS组由鼻部进展为眼部症状的平均年限为(0.88±0.25)年,显著低于非OAS组[(1.57±0.35)年,P=0.037]。OAS组生活质量评分为(3.54±0.12)分,显著高于非OAS组[(3.19±0.06)分,P=0.007]。OAS组共自报111次食物过敏原。最常见的致敏食物依次为苹果(25.2%)、桃子(17.1%)。结论 OAS患者更易出现呼吸道受累,生活质量更易受到影响。
    关键词:鼻炎,变应性,季节性;口腔过敏综合征;食物过敏;危险因素;疾病病程;

    食物过敏危险因素

  • 富血小板血浆对小鼠下肢缺血血管生成的作用研究

    作者:袁园;张潇;邵菊;孙芳;李蓉; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 探究富血小板血浆(PRP)促进下肢缺血血管新生的作用与机制。方法 12只C57BL/6J小鼠在下肢缺血术后,将其分为两组,用多普勒血流扫描仪在不同时间节点扫描记录下肢的血流灌注情况;术后14d收集小鼠腓肠肌来评价肌肉中血管新生,同时检测血管内皮细胞生长因子(VEGF-A)、血小板衍生生长因子(PDGF-BB)的表达。结果 研究发现,PRP组小鼠下肢缺血部位血流恢复明显,缺血侧肌肉中CD31和α-SMA表达存在差异,且VEGF-A、PDGF-BB的表达存在显著性差异(P<0.05)。结论 PRP能促进缺血下肢的血管形成,促进其血流恢复。
    关键词:下肢缺血;血管形成;富血小板血浆;

    下肢缺血血管形成富血小板血浆

  • 白藜芦醇对糖尿病大鼠视网膜Muller细胞凋亡的防护作用及分子机制研究

    作者:曾凯宏;王元;邓波;余雪梅;宋怡;周雪;黄璐娇; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 视网膜Muller细胞凋亡发生在糖尿病视网膜病变(DR)早期,探讨自藜芦醇在DR早期Muller凋亡中的重要意义。方法 5、10mg·kg-1·d-1白藜芦醇喂养健康和糖尿病大鼠1~7个月后取材,使用TUNEL检测Muller细胞凋亡,免疫荧光检测转录因子特异蛋白1(SP1)细胞定位,qRT-PCR检测miR-29b和SP1基因表达,Western blot检测SP1蛋白表达。结果 糖尿病1、3、5和7个月大鼠视网膜中均检测到TUNEL阳性细胞,白藜芦醇干预能有效抑制糖尿病引起的大鼠视网膜内核层(INL)Muller细胞凋亡(P<0.01)。与年龄相匹配的健康对照大鼠相比,糖尿病大鼠视网膜中miR-29b的表达显著降低,SP1表达显著增高(P<0.01),糖尿病引起的miR-29b表达下调和SP1表达上调均能被白藜芦醇干预抑制(P<0.05)。结论白藜芦醇是一个潜在的治疗DR的选择,miR-29b/SP1信号通路在白藜芦醇的抗凋亡机制中起重要作用。
    关键词:白藜芦醇;糖尿病视网膜病变;Muller细胞;细胞凋亡;微小RNA-29b;特异性蛋白1;

    白藜芦醇糖尿病视网膜病变Müller细胞细胞凋亡

  • miR-34a对乳腺癌细胞增殖与侵袭的影响

    作者:冯刚;李良平;樊友本;刘志苏; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 研究miR-34a对乳腺癌细胞生物学功能的影响及其作用机制,为乳腺癌的诊治提供理论依据。方法 实时荧光定量PCR法检测miR-34a在乳腺癌细胞系中的表达,CCK8法、Transwell实验检测miR-34a对乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响,双荧光素酶法和Western blot法对靶基因Wnt1进行验证,并检测其下游基因β-catenin、CyclinD1的表达。结果 miR-34a抑制乳腺癌细胞的增殖、侵袭能力,Wnt1蛋白为miR-34a的直接作用靶点,过表达miR-34a可直接抑制Wnt1蛋白的表达,下游基因β-catenin、CyclinD1也受到抑制。结论 miR-34a直接靶向作用于Wnt1蛋白从而抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。
    关键词:乳腺肿瘤;miR-34a;Wnt1;细胞增殖;肿瘤侵润;

    乳腺肿瘤miR34aWnt1细胞增殖肿瘤侵润

  • 芦丁对梗阻性肾病大鼠肾脏氧化应激损伤及Nrf2/HO-1通路的影响

    作者:王斌;赵明;陈志勇;赖永通;郭雪坤;黄先恩;赵国志;蔡瑞明;林民专; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 探讨芦丁对梗阻性肾病大鼠肾脏氧化应激损伤及Nrf2/HO-1通路的影响。方法 雄性Wistar大鼠分为4组:假手术组、芦丁治疗假手术组、模型组、芦丁治疗模型组。术后24h,芦丁治疗假手术组和芦丁治疗模型组给予芦丁[100mg·kg-1·d-1溶于1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶液]灌胃,其他两组给予等体积的1%CMC-Na溶液灌胃。术后2周处死全部大鼠,取梗阻侧肾组织测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾脏病理改变,免疫组织化学方法检测肾组织内血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白的表达水平。Western blot方法检测肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)和HO-1蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组肾脏病理损害明显加重,肾组织内MDA水平明显增加(P<0.05),SOD及GSH-Px活性明显降低(P<0.05),Nrf2与HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,芦丁治疗模型组肾脏病理损害明显减轻,肾组织内MDA水平明显减少(P<0.05),SOD及GSH-Px活性明显升高(P<0.05),Nrf2与HO-1蛋白表达水平进一步升高(P<0.05)。结论 芦丁可减轻梗阻性肾病大鼠肾脏氧化应激损伤,此效应可能是通过介导Nrf2/HO-1信号通路实现。
    关键词:芦丁;梗阻性肾病;氧化性应激;血红素加氧酶-1;核因子E2相关因子2;

    芦丁梗阻性肾病氧化性应激血红素加氧酶1核因子E2相关因子2

  • 激活AMPK对妊娠高血压大鼠HO-1水平、血压和尿蛋白的影响

    作者:叶海琼;傅晓冬;钟华; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 探讨激活AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)对妊娠高血压大鼠的保护作用。方法 建立妊娠高血压大鼠模型,用AMPK特异性激动剂阿卡地新(AICAR)干预后,分为正常妊娠组、亚硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME)组、L-NAME+AICAR组,测量大鼠血压,ELISA测定24h尿蛋白,胎盘组织苏木精-伊红(HE)染色,免疫组织化学检测AMPK、血红素氧合酶-1(HO-1)表达的细胞定位,Western blot检测胎盘组织AMPK、HO-1表达水平。结果 与正常妊娠组孕鼠比较,L-NAME组孕鼠血压升高,24h尿蛋白水平显著增加,AMPK、HO-1表达水平降低(P<0.05)。与L-NAME组比较,L-NAME+AICAR组血压降低,24h尿蛋白减少,AMPK、HO-1表达水平升高(P<0.05)。结论 激活AMPK可提高妊娠高血压大鼠HO-1水平、降低血压及减少24h尿蛋白。
    关键词:高血压,妊娠性;AMP依赖的蛋白激酶;血红素氧合酶-1;24小时尿蛋白;

    AMP依赖的蛋白激酶血红素氧合酶124小时尿蛋白

  • 新疆某三甲医院慢性肾衰竭住院患者的病因构成分析

    作者:郑笑;谢大星;陆晨;张长荣;杨淑芬; 期刊:《重庆医学》 2019年2期

    目的 分析新疆地区慢性肾衰竭(CRF)住院患者的病因构成变化,为疾病的预防和诊治提供一定的依据。方法 收集新疆维吾尔自治区人民医院肾病科2010年1月1日至2017年12月30日诊断为CRF的9 850例患者病案资料,并分析数据。结果 近8年CRF患者的例数呈上升趋势,男女比例为1.14∶1.00,汉族和维吾尔族构成患者的主要部分(86.69%),年龄集中在45~59岁(52.52%)。CRF患者的病因构成主要为慢性肾小球肾炎、IgA肾病、膜性肾病、糖尿病肾病和高血压肾病等,其中慢性肾小球肾炎居于首位,IgA肾病有下降趋势,而膜性肾病、糖尿病肾病和高血压肾病则呈上升趋势。不同性别、民族和年龄阶段的病因构成和顺位存在明显差异且具有统计学意义(P<0.05)。结论 CRF患者的病因构成因性别、民族、年龄的不同而发生变化。
    关键词:肾功能衰竭,慢性;病因构成;住院病人;肾病;

    病因构成住院病人肾病

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